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熒光顯微鏡的正確使用方法介紹

來源：技術(shù)文章更新時間：2022-01-06 瀏覽：1353次

熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。

　　熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。

　　使用方法：

　　(1)打開燈源，超高壓汞燈要預(yù)熱15min才能達(dá)到最亮點(diǎn)。

　　(2)顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片，在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾片。熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。

　　(3)用低倍鏡觀察，根據(jù)不同型號顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置，調(diào)整光源中心，使其位于整個照明光斑的中央。

　　(4)放置標(biāo)本片，調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察，以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標(biāo)本時，必須用無熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開，需待汞燈*冷卻后才能再啟動，否則會不穩(wěn)定，影響汞燈壽命。

　　(5)觀察。例如:在顯微鏡下用藍(lán)紫光濾光片，觀察到經(jīng)0.01%吖啶橙熒光染料染色的細(xì)胞，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。