倒置熒光顯微鏡是利用一個(gè)高發(fā)光效率的點(diǎn)光源,經(jīng)過(guò)濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長(zhǎng)的光(如紫外光365nm或紫藍(lán)光420nm)作為激發(fā)光,激發(fā)檢測(cè)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)的放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像的光學(xué)顯微鏡,是檢驗(yàn)的重要儀器之一。
除了具有光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和光學(xué)放大作用外,基于熒光的特性,倒置熒光顯微鏡還具備以下*的功能要求:
(1)提供足夠能量的能激發(fā)出熒光的光源。
(2)有著適應(yīng)不同物質(zhì)所需的激發(fā)光譜一組濾色片,從光源中選擇合適的激發(fā)光譜,使析出的光譜與該物質(zhì)的吸收光譜重合,以期望獲得大的熒光。
(3)為獲得較弱的熒光圖像,還要建立一套截止濾色片,它使所需觀察的熒光進(jìn)入系統(tǒng)成像,而將其余的光波,包括發(fā)射光阻擋在外,用來(lái)提高圖像的襯度。
(4)放大的光學(xué)系統(tǒng)應(yīng)適應(yīng)熒光的特性,終獲得既能觀察又能攝影的高亮度、高分辨力的良好襯度 的熒光圖像。
(5)儀器的安全性。應(yīng)用汞燈要防止紫外線的泄漏和汞燈的爆炸,保證電器安全。
倒置熒光顯微鏡操作時(shí)需要注意的事項(xiàng):
1.顯微鏡放置處備有除濕機(jī)降低濕度,防止鏡片受潮發(fā)霉。
2.如培養(yǎng)液不慎滴落于物鏡上,須盡快以拭鏡紙沾純酒精輕輕擦拭干凈。
3.正確記錄熒光燈泡開(kāi)啟/關(guān)閉時(shí)間,熒光燈源開(kāi)關(guān)后需等15-20分鐘才能再開(kāi)啟。
4.熒光燈泡于使用200-250小時(shí)內(nèi)更換。